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동물실험

1차 동물 실험

「 아토5분이 아토성 피부염
생쥐에 미치는 영향 」
시험분석 : 인제대학교 제약공학과 김동욱 교수
피부염이 유발된 실험군에 아토5분 50%와 증류수 50% 함유액을 100ml 씩 21일 동안 도포하고
대조군에는 기제(증류수)를 동량 도포하여 육안적인 변화를 관찰하였다.
피부상태는 점차 개선되어 21일후(실험시작 57일 경과 후)에는 거의 정상적인 피부가 되었다.

아토피 유발 과정

  • 도포 전
  • 7일 후
  • 14일 후
  • 21일 후
  • 30일 후
  • 36일 후

아토5분 도포 실험

  • BEFORE
  • AFTER

혈청내 lge량 증가량 비교 도표

아토5분을 사용한 결과, 단순히 기제만 도포했을 때에 비해 IgE 수치가 30% 감소한 것으로 나타났다.
이를 통해 아토5분이 아토피 피부에 매우 효과적임을 확인할 수 있다.
3주간 lge량 30% 감소
  1. 피부염이 유발된 실험군에 아토5분 50%와 증류수 50% 함유액을 100ml씩 21일 동안 도포하고
    대조군에는 기제(증류수)를 동량 도포하여 육안적인 변화를 관찰하였다.
    피부상태는 점차 개선되어 21일후 (실험시작 57일 경과 후)에는 거의 정상적인 피부가 되었다.
  2. 생후 7주된 암컷 무모 마우스(hairless mice) 2마리를 1-클로로-2, 4-디니크로벤젠(1-chloro-2, 4-dinitrobenzene:DNCB) 비처리군, DNCB 처리군,
    DNCB 처리 후 7 처리군으로 각각 7마리씩 나누었다. 비처리군에는 마우스의 피부에 아무것도 도포하지 않았다.
    DNCB처리군에는 1% DNCB용액(아세톤용매) 100ul를 등 부위에 보포하여 감직하였다 (0일).
    7일 후 0.5% DNCB용액 50ul를 도포하였으며, 이후 2일 간격으로 0.5% DNCB 용액 100ul를 36일 동안 도포하여 피부염을 유발하였다.
    36일 경과 후 피부의 상태는 염증이 매우 심하였다.
  3. 피부염이 유발된 실험군에 아토5분을 21일동안 도포하였고 피부상태는 점차 개선되어
    21일 후 (실험시작 57일 경과 후)에는 거의 정상적인 피부가 되었다.
  4. 아토5분 처리 시작 21일째 날(실험시작 57일 경과) 실험동물을 데릴 에테르로 마취한 후 복부 대동맥에서 헤려하여
    혈청을 분리하고 마우스 IgE엘리사키트 (Mouse IgE KIT, SHIBAYAGI, Japan)를 이용하여 혈청 내 IgE량을 측정하였다.
    아토피를 유발하지 않는 실험군에서는 IgE의 농도가 0.123ul/ml이었으며,
    아토피를 유발 후 아토5분을 도포한 실험군에서는 IgE의 농도가1.982ul/ml이었다. 아토5분을 사용한 경우에는 기제만을 도포한 경우에 비해 30%의 lgE가 감소하였다. 따라서 아토5분은 아토피에 매우 효과적인 것으로 확인되었다.

2차 동물 실험

「 아토5분이 아토성 피부염
생쥐에 미치는 영향2 」
시험분석 : 인제대학교 제약공학과 김용호 교수
육안 및 병리조직학적 특징에서는 정상군에 비하여
DNCB 단독처리군에서는 투명층, 과립층에서 현저한 염증성 변화를 보이고 있음에 비하여
DNCB+아트크립, 우츄 +5.0%, 아토5분 처리군은 정상군에 유사한 병리조직학적 특징을 보이고 있다.
  • 정상 대조군 피부의
    육안적 특징
    생리식염수 처치 후,
    피부의 육안적 소견은 정상임
  • DNCB 처리군 피부의
    육안적 소견
    DNCB 처리 후, 육안적으로
    명확한 염증을 보이고 있다
  • DNCB+5.0% 아토5분 크림처리군
    피부의 육안적 소견
    정상 대조군 피부의
    육안적 소견과 매우 유사함

실험동물 피부에 대한
병리조직학적 소견

정상대조군 및 실험군에 대한 피부병리학적 소견은 정상대조군의 투명층에 시야 당 평균 3 2개의 대식세포가 분포되어 있음에 비하여
DNCB 단독 처리군에서 현저한 증가를 보이고 이어서 DNCB+아토크림에서는 DNCB 단독 처리군에 비하여 감소된 경향을 보이고 있다.

DNCB+5.0% 아토5분 처리군에서는 투명층은 정상대조군에 유사하였다.
한편 과립층은 정상대조군은 성숙세포로 분포되어 있으나 DNCB 처리군에서는 현저한 유약화 현상을 보이고 있으며
이에 비하여 DNCB+아토크림그룹 에서는 DNCB 단독처리군에 비하여 감소된 경향을 보였다.

DNCB+5.0% 아토5분 처리군에서는 정상대조군의 과립층 세포 배열과 유사하지만 다소 유약화 세포가 존재하고 있음을 보였다.
  • 정상 대조군의 피부조직학적 특징
    정상대조군에 대한 피부 조직학적 특징은
    투명층 평균 2정도의 대식세포가 관찰됨
  • DNCB처리군의 피부조직학적 특징
    투명층에 많은 수의 대식세포가 되었고,
    과립층 세포의 유약화가 현저하다.
  • DNCB+5.0 아토5분 처리군
    피조직학적 특징
    비만세포 70% 감소(3주) - 비만세포에서
    가려움을 일으키는 히스타민 분비함

아토5분의 피부처리가
간장 효소활성에 미치는 영향

'아토5분 원액'과 '생리식염수로 희석시킨 50% 아토5분'을 3주동안 Balb/c 제모 실험동물에 처리한 후
채취된 혈청으로 분석된 간장기능평가 지표효소의 값은 다음과 같다.
 AST 및 ALT 값의 변동
  1. AST는 정상 대조군 51±0.70 unit에 비하여 독성실험군 (I) 59.2 ±4.60 unit, 독성실험군 (II) 52 ±1.58 unit를 50% 생리식염수로 희석시킨 죽초액을
    도포시킨 실험군에서는 정상군과 유사한 활성을 보였다. 그러나 원액을 도포시킨 독성실험군 (I)의 경우에는 59.2±4.60 unit를 보여 아토5분 원액의 도포가
    간장에 다소 영향을 미치는 경향을 보였다.
  2. ALT 측정값은 정상군 27.8±2.04 unit, 독성실험군 37±1.58 unit alc 독성실험군 (II) 30.8±2.39 unit를 나타내어 AST와 유사하게 독성실험군 (I)은 간장효소의
    활성을 높여 다소 간장에 영향을 미치는 것으로 평가되었으나 독성실험군 (II)는 정상군과 거의 유사한 값을 보였다.
    따라서 피부에 처치하고 할 경우 50% 이하의 농도를 유지시킴이 필요하다.
실험군/그룹 정상 대조군 독성실험군(I) 독성실험군(II)
AST ALT AST ALT AST ALT
1 50 30 64 35 53 32
2 51 26 62 36 52 28
3 51 30 52 39 51 29
4 52 29 60 37 54 31
5 51 26 58 38 50 34
평균
±
표준
편차		 51
±
0.70		 27.8
±
2.04		 59.2
±
4.60		 37
±
1.58		 52
±
1.58		 30.8
±
2.39
정상 및 실험군 AST, ALT 비교
  • AST
  • ALT

실험군의 lgE 측정값의 특성

DNCB를 Balb/c 제모실험동물을 3주동안 처치한 결과 정상대조군 0.65 ± 0.01 IU/ml에 비하여 1.0±0.01 IU/ml로 1.69배 증가하였다.
양성대조군으로 시판중인 아토크림을 DNCB와 같이 처치한 그룹은 0.52 ± 0.00IU/ml로서 비처리 대조군보다 낮은 값을 보였다.
그러나 아토5분을 처치한 5.0% 그룹에서는 0.77±0.04 IU/ml을 보여 DNCB 처치군에 비하여 개선된 경향을 보였다.
통계적인 의의는 DNCB+5.0% 아토5분 그룹에서 보였다.
치료제 : 아토5분(상품)
실험군
/
그룹		 대조군 DNCB군 DNCB+5.0%
아토5분
10.81.01.0
2 0.7 1.2 0.5
3 0.6 1.0 0.9
4 0.5 1.2 0.7
평균
±
표준
편차		 0.65
±
0.01		 1.1
±
0.01		 0.77
±
0.04
정상 및 실험군의 lgE 측정값의 비교
3주간 lge량 30% 감소

아토5분 단독처리군의
간,신장 병리조직학적 소견

아토5분 단독처리군에 대한 간, 신장 병리조직학적 소견은 정상적인 형태를 보임
  • 아토5분 단독처리군에 대한
    간장세포의 조직학적 소견
  • 아토5분 단독처리군에 대한
    신장세포 조직학적 소견
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